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樣本中存在溶血、脂血或黃疸現象,會對ELISA試劑盒的檢測結果產生影響嗎??

日期:2025-12-22 15:06:48

    樣本中存在溶血、脂血或黃疸,都會對ELISA檢測結果產生明顯干擾,甚至導致結果失真,具體影響和原因如下:
 
1、溶血的干擾
    溶血是指紅細胞破裂,釋放出細胞內的血紅蛋白、酶類、離子等成分。
    血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,而ELISA常用辣根過氧化物酶(HRP)作為標記物,血紅蛋白會直接催化底物顯色,造成非特異性信號升高,使檢測結果假性偏高。
    紅細胞內的其他成分還可能吸附到酶標板孔壁,或與抗體發生非特異性結合,增加背景噪音,降低檢測的特異性。
 
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2、脂血的干擾
    脂血是樣本中脂質(如甘油三酯、膽固醇)含量過高,表現為樣本渾濁、呈乳白色。
    大量脂質微粒會改變樣本的均一性,干擾抗原抗體的特異性結合,同時可能在酶標板孔壁形成疏水層,阻礙反應物的結合,導致檢測信號偏低。
    脂質還可能包裹目標抗原,降低其與抗體的接觸概率,造成結果假性偏低;部分脂質成分也可能引發非特異性吸附,使背景值升高。
 
3、黃疸的干擾
    黃疸樣本因含有大量膽紅素而呈黃色,膽紅素是一種強還原劑。
    對于以HRP為標記物的ELISA,膽紅素會抑制HRP的酶活性,減少底物的顯色反應,導致檢測信號降低,結果假性偏低。
    膽紅素本身的顏色也會干擾吸光度的直接讀取,尤其是當檢測波長與膽紅素的吸收波長相近時,會造成讀數誤差。
 
應對建議:
    盡量避免采集、處理過程中出現溶血(如輕柔操作、避免劇烈震蕩);
    脂血樣本可通過3000×g離心15–20分鐘去除部分脂質,或使用專用的脂蛋白去除試劑盒;
    嚴重黃疸或溶血的樣本建議重新采集;若無法重采,可參考試劑盒說明書,設置相應的樣本空白或采用校正公式進行結果修正。